Malt β-glucanase / Lichenase - Dosage des activités enzymatiques

Référence : K-MBG4

Méthode pour doser le Malt β-glucanase / Lichenase

Pays éligibles à la livraison :

France Métropolitaine (hors Corse et DOM-TOM), Algérie, France DOM-TOM, Polynésie française, Libye, Maroc, Tunisie, Égypte, France Métropolitaine (Corse)

Méthode pour doser le Malt β-glucanase / Lichenase

Température de livraison : ambiante

Température de stockage :
- Stabilité à court terme: 2-8°C
- Stabilité à long terme: voir les étiquettes de chaque composant

Format de dosage : spectrophotomètre, auto-analyseur

Méthode de détection : absorbance - 400

Réponse du signal : croissance

Temps d'analyse :
- Malt β-glucanase : 20 min (manuel) / 10 min (automate)
- Lichenase : 10 min (manuel) / 10 min (automate)

Limite de détection :
- Malt β-glucanase : 4,3 x 10^-4U/mL ou
- Lichenase : 9,1 x 10^-5U/ml

Reproductibilité (%) : ~ 3%

Stabilité : > 2 ans dans les conditions de stockage recommandées

Le réactif MBG4 contient un substrat unique, dénommé 4,6-O-benzylidene-2-chloro-4-nitrophenyl-β-(31-β-D-cellotriosyl-glucoside) (BCNPBG4).

Le groupe acétal benzylidene empêche toute action hydrolytique par des enzymes hydrolytiques exo-actives telles que la β-glucosidase ou la cellobiohydrolase.
"Mixed linkage β-glucanase (endo-1,3:1,4-β-glucanase) / Lichenase (EC 3.2.1.73)" agit spécifiquement pour libérer le CNP (2-chloro-4-nitrophenol) de ce substrat.

Le taux de libération du CNP est directement relié à l'activité β-glucanase / Lichenase dans un échantillon. La réaction est terminée et la couleur phénolate se développe en ajoutant la solution de tampon Tris (pH = 10.0).

NOTE : le substrat n'est pas hydrolysé par la β-glucosidase ou la cellobiohydrolase. Il peut être hydrolysé par certaines endo-cellulases (par exemple Trichoderma sp.), mais cela ne résulte pas en une augmentation en absorbance.

Nouvelle méthode